安排样本一般是制成安排匀浆,处理办法如下:
1)取适量安排块,于预冷pbs(0.02mol/l, ph 7.0-7.2)中清洗去除血液,称重后备用(安排块较大需先剪碎后再匀浆) ;
2)可一起选用多种匀浆办法到达较好的破碎效果:首先将安排块移入玻璃匀浆器,加入 5-10ml预冷pbs(安排与 pbs 的质量体积比主张为 1:5,即1g 样本加入 5ml pbs)进行充沛研磨(有条件试验室可选用机器匀浆),该进程需在冰上进行;得到的匀浆液可再运用超声破碎或重复冻融进一步处理(超声破碎进程中留意冰浴降温;重复冻融法可重复 2 次) 。
3)将制备好的匀浆液于5000×g 离心 5分钟,留取上清即可检测。
4)假如样本需要*保存,请增加蛋白酶抑制剂。依据试验需要,安排匀浆样本可先定量总蛋白,以便于统计分析数据。某些安排样本如肝脏,肾脏,脑安排会有假阳性反应。
进口elisa试剂盒处理样本的进程便是搜集目标蛋白的进程,由于蛋白简单变性,降解,故该进程应尽量温文。样本处理之后的贮存也非常重要,特别留意不要重复冻融,样本处理之后可分装密封保存,4 度保存应小于 1 周,-20 度不应超过 1 个月,-80度不应超过2个月。在标本运用前应缓慢均衡至室温,不应加热使之融解。样本的处理是试验成功的*步, ,以上便是关于常见样本处理办法的一个简述,供研究者参考.