现在国标中规定使用的培养基主要有四种,其菌落特征分别如下:bs 琼脂菌落为黑色有金属光泽、棕褐色或灰色,菌落周围培养基可呈黑色或棕色; 有些 菌株形成灰绿色的菌落,周围培养基不变。 he 琼脂蓝绿色或蓝色,多数菌落中心黑色或几乎全黑色;有些菌株为黄色,中心黑色或 几乎全黑色。 xld 琼脂菌落呈粉红色,带或不带黑色中心,有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中心,或呈现全部黑色的菌落;有些菌株为黄色菌落,带或不带黑色中心。沙门氏菌属显色培养基 按照显色培养基的说明进行判定。 要是条件允许的话推荐使用沙门显色培养基,沙门氏菌在这种培养基上的菌落特征非常明显,一般为紫红色。容易分辨且不易漏检。沙门氏菌显色培养基原理:
蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;胆盐抑制革兰氏阳性菌;选择性添加剂增强培养基的抑制杂菌的能力;混合色素分别与沙门氏菌和大肠菌群所对应的酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上沙门氏菌产生品红色的菌落,大肠菌群产生蓝绿色的菌落。
沙门氏菌显色培养基使用方法:
1、称取本品47.5g,混合均匀加热至100℃,并按常规不断搅拌直至*溶解(不能持续高温加热,建议不要重复煮溶),不需高压灭菌,冷至50℃,加入10支沙门氏菌选择性添加剂(冻干粉每支需先用1ml无菌水溶解),混匀,倾注灭菌平皿。
2、按国家标准、sn标准、fda标准或其它方法制备样品液与增菌液。
3、建议使用二步增菌法:
(1)前增菌:将处理过的样品25g置于225ml缓冲蛋白胨水中,混合均匀后37℃培养6~8h;
(2)选择性增菌:取前增菌液1ml加入到9ml四硫磺酸钠煌绿增菌液(ttb)中,混合均匀后37℃培养18~24h;
4、用接种环取增菌液一环,划线接种于沙门氏菌显色平板上,置于36±1℃培养18-24小时。
5、观察结果。挑取显色平板上呈品红色,扁平透明,边缘光滑,直径约2mm的可疑菌落进行进一步的试验。
6、可使用microgentmgn-id或api20e或生化管试验,对疑似沙门氏菌菌落进行生化鉴定。