美国polysciences公司成立于1961年,主要生产和经营life sciences生命科学(胶体金,不含甲醛的甲醇等),病理学和显镜学 微球和粒子和磁珠各种单体和聚体等产品。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供应商,同时是世界*的免疫学,组织化学试剂耗材供应商.
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转染试剂线性pei溶液的配制(1mg/ml)
聚乙烯亚胺(polyethylenimine,pei)是聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子,每相隔二个碳个原子,即每“第三个原子都是质子化的氨基氮原子,使得聚合物网络在任何ph下都能充当有效的“质子海绵”(proton sponge)体。pei,可用作转染试剂,它可以缩聚dna分子形成颗粒并转染真核细胞。有实验证明,分子量为25000的线性pei即polysciences 23966转染效率zui高。
下面将主要介绍polysciences 线性pei(#23966)的产品特性及其溶液的配制过程。
1. 产品特性:
产品名称:线性聚乙烯亚胺(pei)
cas号
9002-98-6,26913-06-4
分子式
(ch2ch2nh)n
分子量
25000
熔点
73-75°c
外观
白色或黄色固体
结构式
溶解性
溶于热水,低ph值的冷水,甲醇和乙醇;不溶于:苯,aether和丙酮
储存
室温
2. 溶液配制
此指导说明书是经polysciences公司研究,测试及其客户反馈的后编写的。下面推荐一种简单适用而的方法,讲述如何配制浓度为1mg/ml的转染试剂的配制。
材料:
1g #23966、1l 纯水(milli-q®纯水,注射用水(wfi),或类似的生物级水)、12 m盐酸、10 m氢氧化钠、一次性0.1-0.2µm pes真空无菌过滤器、无菌高聚乙烯或聚丙烯试剂瓶。
器材:
1 l 玻璃烧杯、1 l玻璃量筒、核准ph计、2支1 ml塑料移液管、托盘、聚四氟乙烯(ptfe)搅拌棒、真空泵
配制过程:
1g #23966——900ml水溶解——搅拌、加热(60-80°c)——加hcl调ph到2.0左右——盖上烧杯,搅拌3h(直至粉末完全溶解)——冷却至室温——加naoh调ph到6.9-7.1——移液到量筒,加水补足至1l——真空过滤消毒——分装,-20°c保存。
备注:加热或加酸都有助于pei溶解。当然酸可能不用加那么多,详细用量可试加一点搅拌看看,足够溶解就行,不一定需要加到ph那么低。
试剂储存:
冷冻部分溶液可在-20°c保存长达一年;部分解冻的溶液可在4°c保存2周,不可反复冻融。
粉末储存:
未开封的粉末有效期两年。可在室温下保存直至使用。
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