动物细胞多数需要微碱性环境，ph约为7.2~7.4，以不超出6.8~7.6范围为宜。缓冲系统对于维持培养基的ph是至关重要的，动物培养基的ph是通过模拟血浆中天然存在的
  co2/nahco3（实际是co32-/hco3-）系统来控制的。配置动物培养基时，会将nahco3作为等渗溶液的一部分添加到培养基。
   一方面，由于nahco3不稳定，易分解产co2，co2从培养液中游离到空气中，会使培养液ph升高；另一方面，细胞呼吸产生的co2以及代谢产生的酸性代谢产物，又使ph降低。
     在培养开始的一段时间，细胞较少，呼吸产生的co2较少，前者作用大于后者，培养液中ph可能会明显上升，这就需要培养箱中补充一定量的co2来维持ph；而后期随着细胞数目增多，细胞产生co2增加，后者作用便大于前者，此时，培养基中ph可能会明显降低，尽管大多动物细胞耐酸能力比耐碱能力略强一些，但如果超过警戒值，则需要更换培养基进行传代。
   培养液中一般加入酚红作为ph指示剂，所以此培养基中颜色变化是：樱桃红色→粉红色→黄色。如果使用培养基之前，先通入co2，或在co2培养箱内进行开放式培养，则培养基颜色变化是：樱桃红色→黄色。如果培养基变黄，则需要及时更换培养基。
  培养箱中co2浓度应与培养液中nahco3浓度相平衡，如果培养箱中co2浓度设定在5%，培养液中nahco3的加入量应为1.97 g/l；如果co2浓度维持在10%，则nahco3的加入量应为3.95 g/l。
   动物细胞对ph变化比较敏感，但植物细胞就没那么娇弱了，培养过程中ph的变化幅度只要别太大，对它并不会造成明显损伤。

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