原代细胞(primaryculturecell)是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织大鼠组织和兔组织等)经蛋自酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞，称为原代细胞。原代细胞生长缓慢，一般认为，培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了，细胞的生长会出现停滞，大部分细胞衰老死亡。
在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。
原代细胞是接近和最能反映体内生长特性的细胞，适用于药敏试验、细胞分化等实验研究。
研究中常用的细胞系/株系是现成的，我们只需要进行细胞传代和种子保存。然而，这些细胞系往往因长期体外培养而失去原有的生物学特性，对药物治疗的反应差距越来越大。因此，越来越多的人选择原代细胞。来源于胚胎、组织、器官和外周血，经特殊分离方法制备的原代培养细胞称为原代细胞。原代细胞培养，也称为原代培养，是从供体获得的组织细胞在体外的培养。
动物组织经胰蛋白酶等消化、分散，获得单个细胞，再生长于培养皿中。大多数组织可以制备原代细胞，但生长的快慢及难易程度不一。肾和睾丸常用，甲状腺细胞生长较慢，只用于某些特定的病毒如猪传染性肠胃炎病毒的培养。
这类细胞生命周期有限，在有限的生命周期内需掌握好细胞的生长空间，以保持细胞群中基因型和表型的一致性。