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白介素elisa试剂盒

2022/9/6 11:03:19发布37次查看ip:101.69.253.62发布人:xiaobaba
白介素elisa试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白介素水平。用纯化的人白介素抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白介素,再与HRP标记的白介素抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。

白介素elisa试剂盒的实验步骤:
1、加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在白介素elisa试剂盒酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
2、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
3、配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
4、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
5、温育:操作同3。
6、洗涤:操作同5。
7、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
8、终止:每孔加终止液50μl,终止反应。
9、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
10、计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

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