人ELISA试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定兔血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体中兔Ⅰ型胶原α2(COL1α2)含量。

人elisa试剂盒的操作方法：
双抗体夹心法：
1、包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个EPS板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。
2、加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。
3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。
4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5、终止反应：于各反应孔中加入2M H2SO4 0.05ml。
6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

间接法：
1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；
2、次日洗涤3次；
3、加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时，洗涤；
4、于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml；
5、37℃孵育35-60分钟，洗涤；
6、zuì后一遍用DDW洗涤。
其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。

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